Pemeriksaan Indirect Tinja

Pemeriksaan Indirect

Pemeriksaan Indirect Tinja adalah pemeriksaan secara tidak langsung pada tinja. Pemeriksaan Indirect tinja dengan metode konsentrasi ini memungkinkan bentuk parasit terkonsentrasi mengapung pada lapisan teratas dari suatu larutan, dimana larutan tersebut mempunya Berat Jenis yang lebih tinggi bila dibandingkan dengan BJ parasit, sefangkan material tinja yang lain terpisahkan dari parasit, tenggelam.

Pemeriksaan Indirect Tinja mempunyai 2 metode , yaitu dengan menggunakan Larutan Garam Pekat dan Gula Pekat. Ada perbedaan dari ke-2 larutan ini , dilihat dari Berat Jenis dan Waktu yang digunakan pada proses pengendapan, pada Garam Pekat, Berat Jenis yang dimiliki adalah 1.120 – 1.210 dan membutuhkan waktu 10 menit, sedangkan pada Gula pekat 1.180 dan membutuhkan waktu selama 20 menit.

Teknik pengapungan Garam Pekat ini mempunyai keuntungan cepat prosedur pemeriksaannya, sehingga baik untuk kerja lapangan memuaskan untuk telur telur Ascaris lumbricoides, Hook Wormn, Trichuris Trichiura, Taenia sp, Hymenolepis nana, tempayak Helminthes dan Protozoa.

Teknik pengapungan Gula Pekat ini mempunyai keuntungan dimana telur telur Helminthes dan kista protozoa dapat dikonsentrasikan dengan pengapungan, untuk protozoa, larutan gula pekat lebih memuaskan daripada larutan garam pekat, sebab dengan larutan garam pekat lebih sering menyebabkan pecah dan berkerutnya kebanyakan kista Protozoa dan beberapa telur Helminthes.

Sensibilitas Test pada Bakteri

Sensibilitas Test

Sensibilitas test yaitu penentuan kadar obat terkecil yang dapat menghanbat pertumbuhan bekteri.

Sensibilitas test pada Bakteri bertujuan untuk mengetahui obat yang paling patent/cocok terhadap bakteri penyebab penyakit, terutama bakteri penyebab penyakit kronik, kegunaan lain dari sensibilitas test ini adalah untuk mengetahui resistensi bakteri terhadap berbagai macam antibiotik.

Ada berbagai macam metode pada Sensibilitas Test , yaitu :

1. Metode Dilusi (cair dan padat)
2. Metode Difusi (Kirby Bauwer, Pour Plate, Sumuran)

Akan tetapi metode yang paling sering digunakan adalah Metode Difusi lempeng, karena mempunyai beberapa keuntungan, keuntungannya yaitu Sangat ekonomis, Sederhana, dan Reproduksible.

Disk Antibiotik adalah suatu kertas saring yang mengandung obat tertentu yang konsentrasinya telah diketahui.

Syarat Penggunaan Disk Antibiotik adalah :

1. Tidak kadaluarsa
2. Dibuang 2-3 disk sebelum digunakan
3. Pemakaian disesuaikan antra Disk dengan jenis Bakteri

Disk Antibiotik yang kadaluarsa tidak dapat digunakan karena perubahan sifat disk akan berpengaruh pada konsentrasi obat yang terkandung pada Disk dalam menghambat pertumbuhan bakteri.

Pada Test Sensibilitas, akan ditemukan beberapa bakteri pada saat proses berlangsung, yaitu :

1. Zona Radikal

Zona radikal yaitu suatu daerah disekitar disk dimana sama sekali tidak ditenmukan adanya pertumbuhan bakteri.

2. Zona Irradikal

Zona Irradikal yaitu suatu daerah disekitar disk, dimana pertumbuhan bakteri dihambat oleh disk antibiotik tetapi tetap dimatikan.

3. Zona Hambatan

Zona Hambatan terjadi oleh karena bakteri tidak tumbuh pada sekitar disk akibat pengaruh dari antibiotik.

Coloration des Spores Bactériennes

CHAPITRE I
INTRODUCTION
spore bactérienne est une forme de bactérie qui est dans la course pour se prémunir contre les mauvaises influences de l'extérieur. Immédiatement après les circonstances mieux pour eux, puis les envelopper spores et les bactéries se multiplient Break. Spores communément appelé endospore est que les spores sont formées dans la cellule. Endospore est beaucoup plus résistant à l'influence extérieure de mauvaises bactéries qui est habituellement sous la forme de bactéries végétatives. La sporulation peut être évitée, si l'animal est toujours considéré que le transfert vers ce nouveau média.
Endospores fait tranches peut être vu de l'emballage se compose de l'extérieur, le cortex et le noyau qui contient la structure du noyau. Lorsque les cellules végétatives de former des endospores, ces cellules de nouvelles enzymes, produit de la paroi cellulaire d'une forme complètement nouvelle et modifiée. En d'autres termes sporulation est une forme simple de la différenciation cellulaire, par conséquent, ce processus est examiné en profondeur pour savoir ce que les événements qui déclenchent des modifications des enzymes et la morphologie. Les spores sont généralement considérés comme des organismes refraktil intracellulaire dans la préparation de la suspension cellulaire qui n'est pas de couleur ou d'une des zones incolores sur les cellules colorées sont normaux. paroi de la spore relative ne peut être pénétré, ce qui empêche aussi la perte de pigment des spores après le lavage avec de l'alcool assez longtemps pour éliminer les colorants cellule végétative. Les cellules végétatives pourraient éventuellement être donné un produit de contraste. Les spores sont généralement teintées de vert ou Malachit fuchsine.
Les spores bactériennes peut être ronde, ovale ou cylindrique. Sur la base de son emplacement à l'intérieur des spores cellules germinales, connu sous le nom de l'emplacement central, subterminale et terminale. Il ya des spores d'un diamètre plus grand que le diamètre des cellules germinales, provoquant un gonflement de la cellule bactérienne.
CHAPITRE II
THÉORIE EXAMEN
A. Définition
Endospores sont des structures spécifiques dans plusieurs types de bactéries. Parce que la teneur en eau des endospores est très faible en comparaison avec vegetatifnya cellules, la forme des endospores très dense et très refraktil lorsqu'on les examine sous un microscope. Très difficile endospores colorés avec des colorants ordinaires, ce qui devrait être utilisé et le colorant utilisé est d'habitude spécifiques vert de malachite.
Deux types de bactéries peuvent former des spores telles que Clostridium et Bacillus. Clostridium est une bactérie qui est anaérobie, alors que Bacillus sont généralement aérobies. Endospore structure peut varier pour chaque type d'espèces, mais généralement à peu près égales. endospores bactériennes est une structure qui résiste aux conditions environnementales extrêmes telles que les conditions sèches et chaudes et acides.
bactéries sporulées plus résistants aux désinfectants, la lumière, la sécheresse, la chaleur et le froid. La plupart des bactéries sporulées vivent dans le sol, mais les spores bactériennes peuvent se propager partout.
B. Peinture méthode endospores
Endosopora pas facilement avec des colorants en général, mais une fois colorées, le colorant sera difficile à perdre. C'est la base de méthodes de coloration des spores en général. Dans la méthode Schaeffer-Fulton qui est largement utilisé dans la peinture endospore, endospore premier teinté de vert malachite dans le processus de chauffage. Cette solution est un colorant puissant qui peut pénétrer dans l'endospore. Après le traitement de vert de malachite, des cultures de cellules ont été lavées avec de l'eau, puis recouvert de peinture safranine. Cette technique produit une couleur verte sur le endospores et la couleur rose sur les cellules vegetatifnya.
Les étapes sont comme suit:
1. Utiliser une technique aseptique, préparer une culture bactérienne dans un état de l'air sec et avec un bon chauffage.
2. Préparez un bain-marie chaud.
3. Fermer les préparatifs de verre avec un mouchoir et le placer sur l'étagère au-dessus du bain-marie.
4. Employée comme des gouttes de vert de malachite
5. Chauffer la préparation de verre pendant 5 minutes.
6. Déplacer les préparatifs de verre du bain-marie et de prendre du papier de soie de la préparation.
7. Soit le verre préparations froides puis laver avec de l'eau déminéralisée.
8. Égoutter et ajouter safranine, laisser reposer pendant 2 minutes.
9. Lavez le reste de safranine à l'eau déminéralisée et les taches sèches.
10. Faire des observations de la préparation avec un microscope à l'aide d'huile emersi.
C. Réponse bactéries productrices de spores résistantes et qu'aucune peinture
Spore coloration en utilisant les réactifs différents, à savoir:
a. Primer Dye: vert de malachite.
Les spores peuvent pas être caractérisée comme la coloration des cellules végétatives, causée par la couche de spores n'est pas facile de lier amorce colorant. Pour pénétration de la teinture, de chauffage nécessaire. Une fois donné le colorant primaire, puis les préparations chauffée, les cellules végétatives et les spores seront de couleur verte.
b. Laxatif substance: l'eau.
Une fois le vert de malachite dans les spores, ne peut plus dilunturkan à l'eau courante, qui ne publiera les restes de colorants primaires.
c. Spores fixe
vert. sinon le colorant ne montre pas une forte affeniteit avec des composants de cellules végétatives, l'eau peut melunturkannya, qui devint plus tard incolore.
d. Contraste Colorants: safranine ou solution de fuchsine.
produit de contraste utilisé pour ce colorant rouge qui a été dilunturkan cellules végétatives, qui sera ensuite absorber le colorant de contraste et devient rouge. Les spores restent vertes comme la couleur de la substance primaire.
L'exemple le plus simple est de subtilis espèces Bacilllus et E. Coli. B. Subtilis devient verte après coloration. Cela signifie que B. Avez-endospores subtilis. Endospores plus durable même dans des circonstances extrêmes, comme les produits chimiques linghkungan sec, chaud, ou toxiques. En outre, les endospores sont également plus résistants aux taches. Une fois de couleur avec succès, les spores sont très difficiles à libérer les colorants afin que, lorsque compte tenu de la couleur de safranine encore vert parce que les spores sont difficiles à lier et attacher la couleur de malachite fournis ultérieurement.
Escherichia coli après la peinture sera de couleur rose de safranine. E. coli ne signifie endospores, ont seules les cellules végétatives. Parce que E. coli ne dispose que des cellules végétatives, les cellules végétatives ne sont pas résistants aux taches. Lorsque les locaux de malachite colorées, les cellules végétatives ne peut pas lier de sorte que lorsque malachite dilunturkan, la couleur de malachite peut être perdu. Puis, lorsque compte tenu de la safranine, les cellules végétatives peuvent lier la couleur d'arrière dans la cellule de sorte que la couleur rose.

Pengecatan Spora Bakteri

BAB I

PENDAHULUAN

Spora bakteri adalah bentuk bakteri yang sedang dalam usaha mengamankan diri terhadap pengaruh buruk dari luar. Segera setelah keadaan luar baik lagi bagi mereka, maka pecahlah bungkus spora dan tumbuhlah bakteri. Spora lazim disebut endospora ialah karena spora itu dibentuk di dalam sel. Endospora jauh lebih tahan terhadap pengaruh luar yang buruk dari pada bakteri biasa yaitu bakteri dalam bentuk vegetatif. Sporulasi dapat dicegah, jika selalu diadakan pemindahan piaraan ke medium yang baru.

Endospora dibuat irisan dapat terlihat terdiri atas pembungkus luar, korteks dan inti yang mengandung struktur nukleus. Apabila sel vegetatif membentuk endospora, sel ini membuat enzim baru, memproduksi dinding sel yang sama sekali baru dan berubah bentuk. Dengan kata lain sporulasi adalah bentuk sederhana diferensiasi sel, karena itu, proses ini diteliti secara mendalam untuk mempelajari peristiwa apa yang memicu perubahan enzim dan morfologi.
Spora biasanya terlihat sebagai badan-badan refraktil intrasel dalam sediaan suspensi sel yang tidak diwarnai atau sebagai daerah tidak berwarna pada sel yang diwarnai secara biasa. Dinding spora relatif tidak dapat ditembus, ini pula yang mencegah hilangnya zat warna spora setelah melalui pencucian dengan alkohol yang cukup lama untuk menghilangkan zat warna sel vegetatif. Sel vegetatif akhirnya dapat diberi zat warna kontras. Spora biasanya diwarnai dengan hijau malachit atau carbol fuchsin.

Spora bakteri dapat berbentuk bulat, lonjong atau silindris. Berdasarkan letaknya spora di dalam sel kuman, dikenal letak sentral,subterminal dan terminal. Ada spora yang garis tengahnya lebih besar dari garis tengah sel kuman, sehingga menyebabkan pembengkakan sel bakteri.

BAB II

TINJAUAN TEORI

A.  Definisi

Endospora adalah struktur spesifik yang ditemukan pada beberapa jenis bakteri. Karena kandungan air endospora sangat rendah bila dibandingkan dengan sel vegetatifnya, maka endospora berbentuk sangat padat dan sangat refraktil bila dilihat di bawah mikroskop. Endospora sangat sukar diwarnai dengan pewarna biasa, sehingga harus digunakan pewarna spesifik dan yang biasa digunakan adalah malachite green.

Dua jenis bakteri yang dapat membentuk spora misalnya Clostridium dan Bacillus. Clostridium adalah bakteri yang bersifat anaerobic, sedangkan Bacillus pada umumnya bersifat aerobic. Struktur endospora mungkin bervariasi untuk setiap jenis spesies, tapi umumnya hamper sama. Endospora bakteri merupakan struktur yang tahan terhadap keadaan lingkungan yang ekstrim misalnya kering, pemanasan, dan keadaan asam.

Bakteri pembentuk spora lebih tahan terhadap desinfektan, sinar, kekeringan, panas, dan kedinginan. Kebanyakan bakteri pembentuk spora tinggal di tanah, namun spora bakteri dapat tersebar di mana saja.

B.  Metode Pengecatan Endospora

Endosopora tidak mudah diwarnai dengan zat pewarna pada umumnya, tetapi sekali diwarnai, zat warna tersebut akan sulit hilang. Hal inilah yang menjadi dasar dari metode pengecatan spora secara umum. Pada metode Schaeffer-Fulton yang banyak dipakai dalam pengecatan endospora, endospora diwarnai pertama dengan malachite green dengan proses pemanasan. Larutan ini merupakan pewarna yang kuat yang dapat berpenetrasi ke dalam endospora. Setelah perlakuan malachite green, biakan sel dicuci dengan air lalu ditutup dengan cat safranin. Teknik ini akan menghasilkan warna hijau pada endospora dan warna merah muda pada sel vegetatifnya.

Langkah-langkahnya sebagai berikut:

1.      Gunakan teknik aseptis, siapkan biakan bakteri dalam kondisi udara yang kering dan dengan pemanasan yang baik.

2.      Siapkan waterbath yang dipanaskan.

3.      Tutup gelas preparat dengan selembar tisu dan letakkan pada rak di atas waterbath.

4.      Tetesi dengan malachite green

5.      Panaskan gelas preparat selama 5 menit.

6.      Pindahkan gelas preparat dari waterbath dan ambil kertas tisu dari preparat.

7.      Biarkan gelas preparat dingin lalu cuci dengan air deionisasi.

8.      Keringkan dan tambahkan safranin, diamkan selama 2 menit.

9.      Cuci sisa safranin dengan air deionisasi dan keringkan noda.

10.  Lakukan pengamatan preparat dengan mikroskop dengan bantuan minyak emersi.

C.  Respon Bakteri Penghasil Spora dan yang Tidak Tahan Pengecatan

Pewarnaan Spora menggunakan reagensia yang bebeda, yaitu:

a.       Zat Warna Primer: Malachite Green.

Spora tidak bisa diwarnai seperti mewarnai sel vegetatif, disebabkan karena adanya spore coat yang tidak mudah mengikat zat warna primer. Untuk penetrasi zat warna, diperlukan pemanasan. Setelah diberi zat warna primer, kemudian preparat dipanasi, sel vegetatif dan spora akan berwarna hijau.

b.      Zat Peluntur: Air.

Sekali malachite green masuk ke dalam spora, tidak bisa lagi dilunturkan dengan air mengalir, yang hanya melunturkan sisa-sisa zat warna primer.

c.       Spora tetap

berwarna hijau. sebaliknya zat warna tidak menunjukkan affeniteit yang kuat dengan komponen sel vegetatif, air bisa melunturkannya, yang kemudian menjadi tidak berwarna.

d.      Zat Warna Kontras: Safranin atau larutan Fuchsin.

Zat warna kontras yang berwarna merah ini digunakan untuk mewarnai sel vegetatif yang sudah dilunturkan, yang kemudian akan mengabsorbsi zat warna kontras dan akan berubah menjadi berwarna merah. Spora tetap berwarna hijau seperti warna zat primer.

Contoh yang paling mudah adalah untuk spesies Bacilllus subtilis dan E. Coli. B. Subtilis akan berwarna hijau setelah pengecatan. Hal ini berarti B. Subtilis memiliki endospora. Endospora lebih tahan lama meski dalam keadaan linghkungan ekstrim seperti kering, panas, atau bahan kimia yang beracun. Selain itu, endospora juga lebih tahan terhadap pewarnaan. Sekali berhasil diwarnai, spora sangat sukar untuk melepaskan zat warna sehingga saat diberi warna dari safranin tetap berwarna hijau karena spora sudah mengikat malachite dan sulit mengikat warna yang diberikan kemudian.

Eschericia coli setelah pengecatan akan berwarna merah muda dari safranin. E.coli berarti tidak memiliki endospora, hanya memiliki sel vegetatif. Karena E.coli hanya memiliki sel vegetatif, sel vegetatif tidak tahan terhadap pewarnaan. Saat diwarnai denga malachite, sel vegetatif tidak dapat mengikat malachite sehingga saat dilunturkan, warna malachite dapat hilang. Kemudian saat diberi safranin, sel vegetatif dapat mengikat warna kembali sehingga warna sel menjadi merah muda.